La cromatografia en columna és un mètode àmpliament utilitzat per separar i purificar mescles de compostos químics. La instrumentació de la cromatografia en columna implica diversos components clau que garanteixen una separació efectiva. Aquí teniu una visió general de la instrumentació:
1. Columna
Material:Normalment fet de vidre, acer inoxidable o plàstic.
Mida:Varia segons l'escala de la cromatografia (analítica, preparativa o industrial).
Embalat amb:Fase estacionària (per exemple, gel de sílice, alúmina o resina).
Frit o filtre:Evita que la fase estacionària surti de la columna amb la fase mòbil.
2. Fase estacionària
Composició:Material sòlid amb propietats adsortives específiques.
Tipus:Gel de sílice, alúmina o resines funcionalitzades (per exemple, materials d'intercanvi iònic o d'afinitat).
3. Fase mòbil
Dissolvent o mescla de dissolvents:Porta la mostra a través de la fase estacionària.
Tipus:No polars (p. ex., hexà), polars (p. ex., metanol, aigua) o un gradient de polaritat.
4. Injector de mostres
S'utilitza per introduir la barreja de mostra a la columna.
Pot ser una injecció manual o un sistema automatitzat per a un control precís.
5. Bomba (opcional)
Assegura un flux constant de la fase mòbil.
S'utilitza en cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC) o quan es necessita un control precís del flux.
6. Detector (opcional)
Identifica i quantifica components separats en temps real a mesura que surten de la columna.
Alguns exemples inclouen:
Espectrofotòmetre UV-Vis
Detector de fluorescència
Espectròmetre de masses (MS)
Detector d'índex de refracció (RI).
7. Col·lector de fraccions
Recull les fraccions separades dels compostos a mesura que elueixen de la columna.
Pot incloure la recollida automàtica basada en l'hora o el senyal del detector.
8. Sistema d'adquisició de dades (opcional)
Registra i analitza les dades del detector.
Genera cromatogrames que mostren el procés de separació.
9. Accessoris
Reguladors de pressió:Evitar la sobrepressurització.
Termòstats o escalfadors:Controlar la temperatura de la columna, si cal.
Vàlvules:Gestionar el flux de fase mòbil i mostra.
Per a configuracions més senzilles (p. ex., cromatografia de columna basada en la gravetat), pot ser que no siguin necessàries bombes, detectors i sistemes automatitzats. En canvi, els sistemes de gravetat o de baixa pressió condueixen la fase mòbil a través de la fase estacionària.